당근 캘러스 유기 실험, 당근 캘러스 배양 실험 준비물 및 방법 (carrot callus)

대학교에서 실습한 MS 배지에

당근 캘러스를 유기 및 치상하는 방법과

준비물에 대하여 알아보겠습니다.

 

관심있으시는 모든 학생분들에게 도움이 되었으면 좋겠습니다.

 

MS배지와 관련된 내용은 전 블로그에 있으니

참고 부탁드립니다.

MS배지 만들기, 고체 MS배지 만드는 과정 및 준비물 고구마 치상 실험용 배지 & 피펫 팁 사용법

 

메스, 메스대, 집게	재료의 조제나 이식과 절단에 사용
MS배지	당근 callus를 치상하기 위한 용도
멸균수와 락스 4%	절단한 당근을 넣어 세척하는 용액
당근	캘러스 유기용
유리병	당근을 세척하는 용도
메스실린더	정확한 배지의 정량을 맞추기 위함
피펫	호르몬 첨가시 정확한 양 조절
콜드보러	당근을 절단하는 용도

흙당근 한개를 씻고 동그랗게 잘라 알콜 70%로 소독해준 뒤

유리병에 넣어 락스 2%로 표면을 소독해 줍니다. (두께 2~3cm)

살살 소독할 때 락스2%가 세어나갈수 있으므로

화장지에 꽁꽁 싸매 흔들어 줍니다.

락스 2%에서 멸균수 유리병으로 옮기는 과정에서

집게를 화염소독해주며 옮겨줍니다.

멸균수에 넣은 당근은 5분동안 3번 소독해줍니다.

당근을 동그랗게 잘라주기 위해서

콜드보러와 메스 집게를 화염소독 해줍니다.

 

당근을 놓아둘 페트리디쉬도 화염소독을 해주고

당근을 위에 두고 콜드보러를 당근의 형성층 부분을
동그랗게 절단을 해 줍니다.
당근의 형성층 부분은 다음 장에 그림으로 설명해 드리겠습니다.

당근의 형성층 부분을 그림으로 표현해 보았습니다.

그림의 노란 동그란 띠가 당근의 형성층 부분입니다.
형성층 부분을 포함하여 절단하는 범위는 하얀 동그라미처럼 잘라줍니다.

동그랗게 절단한 당근 형성층을 MS배지위에 5개씩 유기해줍니다.

치상이 끝난 배지를 12월 8일에 신문지의 암배양한 당근을 꺼내 보았습니다.

초록색으로 Callus가 보이는게 확인이 됩니다.

울퉁불퉁하게 올라온 초록색이 당근의 Callus 입니다.

위에 BA 0.5와 2,4-D는 MS배지 내용에 있습니다.

고구마 끝순 채취와 고구마 생장점 배양과 치상 준비물 및 방법

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