NLN배지 만들기, 멤브레인 여과기로 NLN배지 만드는 과정 및 준비물

대학교에서 실습한 NLN배지 만드는 과정과

NLN배지 준비물에 대해서 알아보겠습니다.

 

관심있으시는 모든 학생분들에게 도움이 되었으면 좋겠습니다.

 

NLN배지 준비물 입니다.

정확하게 적어보고 싶어서 실험에 사용된 모든 준비물을

사진을 찍어 올려보았습니다.

스푼	배지 조성을 위한 용도
마그네틱 바, 거름종이	마그네틱 바 : 비커에서 배지를 혼합용도 거름종이 : 시약을 저울에 측정할 때 사용
페트리 디쉬	배지를 분주할 때 사용
비커	배지 조성을 위해 담는 용도
유리병	비커에 있는 배지를 옮겨 담아 오토클래브에 돌리기 위한 용기
메스실린더	정확한 배지의 정량을 맞추기 위함
멸균 필터 시스템 멤브레인 여과기	공기 펌프와 연결해서 사용
오토클래브 테이프	멸균이 잘 되었는지 확인하는 용도

 

 

NLN salt, NLN vitamin	NLN배지의 주 성분
질산화 칼슘	NLN배지의 보조 성분
클린벤치(생물 안전 작업대)	배지의 분주가 이루어지는 곳
HCl, NaOH	pH조절하는 용도 주사기를 이용하여 양 조절
슈크로스	양분 역할
pH농도 측정기	pH농도를 측정하는데 사용
오토클래브 = 고압고온멸균기	1.2기압 121℃ 20분 고압고온멸균

비커에 증류수를 300ml정도 담고 자석 교반기에 돌려줍니다. 그리고 아래의 사진과 같이 비커에 넣어줍니다.

자석 교반기로 다 녹인 용액을 메스실린더에 넣어 500ml를 채워야 하므로

증류수를 더욱 추가시켜 500ml를 채워줍니다.

500ml를 채우고 자석교반기에 다시 돌려 pH농도 측정기로 농도 5.8을 맞추어 줍니다.

 

pH측정기로 pH농도를 5.8을 맞추어 줍니다.
HCl은 pH를 낮추어주고 NaOH는 높여줍니다.

 

 

<pH농도 측정기 사용법>

1) 파란색 마개를 열어주고 밑의 통을 제거한 후 입구를 증류수로 세척합니다.
2) 교반기에 돌리면서 pH농도 측정기를 비커에 넣어줍니다.
3) 측정기에 READY가 나올 때 까지 기다리고 농도를 측정합니다.
4) 측정된 농도에 따라 pH농도가 5.8보다 높으면 HCl로 낮춰주고 낮으면
NaOH 를 분주용 주사기를 이용해 5.8로 맞추어 줍니다.
(한 방울씩 넣어주어야 합니다.)

+

한방울 넣어주고 농도가 변하지 않을 때 까지 기다린 후

다시 한방울 넣어줍니다(5.8이 될때까지)

pH 5.8을 맞춘 NLN배지를 클린벤치 안으로 넣어서

멸균 필터 시스템인 멤브레인 여과기를 포장지를 안에서 뜯어

공기펌프와 연결하여 NLN배지를 멸균시켜줍니다.

 

비커를 부을 때 안에 자석이 들어가지 않게 해줍니다.

그리고 뚜껑에 손이 닿으면 감염 원인이 될 수 있습니다.
비타민이 많으면 열에 약하기 때문에

고압 멸균기 보다는 멤브레인 여과기를 이용합니다.

멸균을 다 마친 NLN배지에 각각 날짜와 조를 적어줍니다.
NLN배지추후에 소포자 배양에 사용됩니다.

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